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高效液相色谱法测定银蒲解毒片中蒙花苷含量

http://www.qctester.com/ 来源: 本站原创  浏览次数:2573 发布时间:2013-11-20 QC检测仪器网
      摘要:蒙花苷具有抗衰老作用、抗缺氧作用、抗不良刺激作用、对机体双向调节作用、抗疲劳作用、抑制血糖升高作用 、毒性及致突变性致畸方面的研究、对学习记忆的影响。
 
      目 的建立银蒲解毒片中蒙花苷的含量测定方法。方法采用高效液相色谱法,AgilentEclipseXDB-C18色谱柱 (4.6mm×250mm,5μm),流动相为甲醇-4%冰醋酸水溶液(47∶53),检测波长334nm。结果蒙花苷线性范围为 2.24~44.8μg(r=0.9991);平均回收率为97.8%,RSD=1.52%。结论方法可靠,简单可行,为控制银蒲解毒片的内在质量提供了 依据。
 
      「关键词」银蒲解毒片;蒙花苷;高效液相色谱法 Keywords:CompoundYinpujieduTablet;Buddleoside;HPLC银蒲解毒片由金银花、蒲公英、野菊花、紫花地 丁、夏枯草组成。银蒲解毒片中的野菊花、金银花均含有绿原酸,绿原酸不稳定,而蒙花苷是野菊花中的特征性成分,因此,笔者采用高效液相色谱法测定蒙花苷含 量,以控制制剂质量。
 
      1仪器与试药Agilent1100型高效液相色谱仪(VWD检测器、Agilent1100色谱工作站),GR-202电子分析天平(精确度为十万分之一),CQX25-06超声波清洗器(上海必能信超声有限公司)。
 
      蒙花苷对照品(中国药品生物制品检定所提供,批号1528-200504),银蒲解毒片(广西玉林制药有限责任公司提供)。甲醇、冰醋酸为色谱纯,其他试剂均为分析纯。
 
      2方法与结果2.1色谱条件AgilentEclipseXDB-C18色谱柱(5μm,4.6mm×250mm);甲醇-4%冰醋酸水溶液(47∶53)为流动相;检测波长为334nm;流速1mL/min;柱温25℃。色谱图见图1。
 
      2.2对照品溶液的制备精密称取五氧化二磷减压干燥(50℃)至恒重的蒙花苷对照品适量,加50%甲醇制成每1mL含22.4μg的溶液,即得。
 
      2.3 供试品溶液的制备取本品20片,除去包衣,研细,取约1.2g,精密称定,置具塞锥形瓶中,精密加入甲醇60mL,密塞,称定重量,超声处理30min, 放冷,再称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀后滤过,取续滤液用微孔滤膜(0.45μm)滤过,作为供试品溶液。
 
      2.4标 准曲线绘制吸取蒙花苷对照品溶液(22.4μg/mL)1.0、5.0、10.0、15.0、20.0μL,分别注入液相色谱仪。以峰面积为纵坐标,蒙花 苷进样量(μg)为横坐标,绘制标准曲线,得回归方程:Y=25.284X-0.8339,r=0.9991,线性范围为0.0224~0.448μg。
 
      2.5精密度试验精密吸取同一供试品溶液10μL,重复测定6次,蒙花苷峰面积RSD=1.06%。
 
      2.6重复性试验精密量取同一提取液6份,照供试品溶液制备项下方法制备,分别测定,每次进样10μL,各样品蒙花苷浓度RSD=1.24%。
 
      2.7稳定性试验精密吸取提取液1.0mL,照供试品溶液制备项下方法制备,分别在0、2、4、8、12h测定。蒙花苷峰面积RSD=1.73%。
 
      2.8加样回收率考察精密吸取已知含量的提取液样品5.0mL,共6份,分别精密加入蒙花苷对照品溶液(22.4μg/mL)2.0mL,照供试品溶液制备项下方法操作。吸取10μL,注入液相色谱仪,测定。见表1。
 
      2.9样品含量测定取样品约1.2g,照供试品溶液制备方法制成供试品溶液,按上述色谱条件测定,以外标法计算样品中蒙花苷含量。见表2。表1加样回收率测定结果(略)表2蒙花苷含量测定结果(略)
 
      3讨论曾采用乙酸乙酯、无水乙醇、甲醇、75%乙醇作溶剂,超声提取30min,放冷,滤过,滤液挥干,用甲醇定容至25mL,用微孔滤膜(0.45μm)滤过,滤液作为供试品溶液。经测定,甲醇提取的效果最好,故采用甲醇作为提取溶剂。
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