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液相色谱法测定百癣夏塔热胶囊中没食子酸的含量

http://www.qctester.com/ 来源: 链接新闻  浏览次数:2688 发布时间:2010-8-27 QC检测仪器网
    目的:用液相色谱法测定没食子酸在百癣夏塔热胶囊中的含量。方法采用ODSC18柱(5μm,4.6mm×200mm),流动相为乙腈0.1%磷酸(5.5∶94.5),检测波长为210nm,流速为1.0ml?min1,柱温:室温。结果苦参碱在0.39~2.60μg范围内线性关系良好(r=0.9991),方法的回收率为96.32%,RSD为1.16%(n=5)。结论该方法能准确可靠地进行苦参碱的含量测定,能够有效地控制该制剂的质量。 

  复方苦参洗剂由苦参、蛇床子、花椒、地肤子、白鲜皮等8味药材组成,其中苦参为君药,其中主要含有生物碱成分,而以苦参碱和氧化苦参碱含量最高,对于其含量测定方法以薄层扫描为主,但其操作复杂。高效液相色谱法也有报道,但是主要以氨基柱为多,也有采用离子对色谱进行测定,对各种色谱条件经过重复性实验,均不能对本品含量进行有效的测定。本文最终以高效液相色谱法,采用常用的C18柱成功地建立了适合本制剂的含量测定方法,制定出合理的含量限度。经过方法学考察及3批样品测定,测定方法提取完全性、重现性、精密度良好,回收率符合要求,整个实验过程可操作性强,能够客观地控制本品的质量。 

  1、仪器与试药 

  1.1仪器Waters600E高效液相色谱仪,Waters600泵,Waters2487紫外检测器,millog色谱工作站。 
  
  1.2试剂与试药苦参碱对照品由中国药品生物制品检定所提供(批号:805-200206),乙腈为色谱纯,其余试剂均为分析纯,水为双蒸水,复方苦参洗剂样品为自制。 

  2、方法与结果 

  2.1色谱条件与系统适用性色谱柱KromosilODSC18(5μm,4.6mm×200mm),乙腈0.1%磷酸(5.5∶94.5)为流动相,检测波长为210nm,柱温:室温。在此条件下,样品得到良好分离。缺苦参阴性对照在苦参碱峰处无峰出现,不干扰本品的测定。 
  2.2标准曲线与线性范围取苦参碱对照品,加甲醇制成每毫升含0.13mg的溶液,作为对照品溶液。分别精密吸取对照品溶液3,5,10,15,20μl,按上述色谱条件注入色谱仪,测定峰面积,以峰面积对苦参碱进样量回归,计算的回归方程为:A=1409106.046C+97272.17,相关系数r=0.9991,苦参碱在0.39~2.60μg范围内与峰面积呈良好线性关系。 

  2.3精密度实验精密吸取样品溶液10μl,连续进样5次,记录峰面积,结果峰面积的RSD0.70%,表明本方法精密度良好。 

  3、讨论 

  在本实验色谱条件下,苦参碱得到良好分离,但是氧化苦参碱不能得到有效分离,经过多方实验,也未能得到理想效果,因此,没有对其进行含量测定。实验中发现苦参碱含量与原药材比较偏高,可能因为处方中蛇床子含有的还原性成分的影响,使氧化苦参碱转变为苦参碱的缘故。本实验色谱条件中流动相pH接近2,在一般色谱柱适用范围下限。因此,实验结束后应立即用水冲洗色谱柱。
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