超高效液相色谱法UPLC的三大优势

谈到超高效液相色谱（UPLC），我们不得不先了解一下它的前身：高效液相色谱（HPLC）。高效高效液相色谱仪对大家来说并不陌生，它是色谱实验室中必不可少的一个设备，该技术是色谱法中重要的一个分支，由于其分离效果好，灵敏度高，适用性强，已广泛应用于化学，生物，制药，环保，检测等科学领域。

早在1906年，色谱法就诞生在俄国，当时著名的植物化学家次维特在论文中首次提到了色谱法和色谱图的概念。经过一个多世纪的不断实验与改进，色谱技术得到了飞速发展。2004年，由Water公司首先推出一种全新的色谱检测技术—超高效液相色谱法。

下面我们分析一下超高效液相色谱法（UPLC）相对于高效液相色谱法（HPLC）的优势所在：
1.速度
超高效液相色谱法（UPLC）采用新型全多孔球形1.7μm反相固定相，该固定相是应用“杂化颗粒技术”（hybrid particle technology，HPT）合成的，并由此制备了高柱效的ACQUITY UPLC色谱柱。这使得在常规高效液相色谱需要30分钟时间的样品分析在超高效液相色谱短短为仅需5分钟，并呈现出色谱柱柱效达20万块/m理论塔板数的超高柱效。

2.灵敏度
我们知道UPLC色谱柱中使用的是1.7μm固定相，分离获得的色谱峰半蜂宽小于1s，这就对检测器的要求是极高的。AQUITY UPLC使用采样速度达40点/s，池体积仅为500mL（约为HPLC池体积的1/20）的新型光导纤维传导得流通池，当光束通过光导纤维进入流通池后，利用聚四氟乙烯池壁的全析射特征，不损失光能最，而使检测灵敏度比HPLC增加2～3倍。光源可使用可变波长的紫外光或二极管阵列系统。

3.自动化
对于UPLC的进样系统，常规的手动进样阀和自动进样阀都不能满足系统需求了。在UPLC中为保护色谱柱不受极端高压力波动的影啊，进样过程应当相对无压方波动，进样系统的死体积必须足够小，以降低样品谱带的扩展。

针对这个问题，UPLC的自动化进样器的设计有了新突破：针内针进样探头（XYZZ）为高速进样机械装里，可快速进样。针内针的含义是使用液相色谱管路（PEEK材料）充当进样针以减少死体积，而“外针”是一小段硬管，用来扎破样品瓶盖；压力辅助进徉。为了降低进样时的交叉污染，采用一强、一弱的双溶剂的进样针清洗步骤，这两种洗针溶剂需同时得到良好的脱气。此技术可保证可靠、重现的进样；在自动进样器内，可安置96位或384位样品盘。每个位置可放置2或4mL样品瓶。新型的样品组织器可接受21个样品盘的编程。

快速进样周期可使UPLC在具有高样品容量的同时也实现高速度，并使无人照管，长时间运行的自动进样得以实现，还具有极低交叉污染的小体积进样能力。

目前，UPLC已广泛用于代谢产物的高通量筛选，痕量杀虫剂的检测，各类生物样品分析等领域。由于该技术的分离速度，灵敏度和自动化方面有更大的优势，相信会在各大实验室得到认可。