SMCTM单分子免疫检测技术(Single Molecule Counting)是蛋白生物标志物检测领域的突破性新技术。利用激光聚焦于爱里斑中单个荧光标记分子,人类首次实现了在单分子水平对蛋白进行计量,并造就了1000倍于ELISA技术的超高检测灵敏度。SMCTM单分子免疫检测技术具备宽至4个log的大动态检测范围, 可根据靶标丰度和成本灵活选择实验方案,便于自行开发检测试剂盒,接近于ELISA的易用性等特征。该技术已被广泛应用于多种疾病生物标志物的检测,包括心血管疾病,炎症,糖尿病,神经疾病,癌症等等,使研究者对生物标志物的应用和认识达到了全新的高度。更重要的是,针对创新性生物标志物的研究,Erenna免疫检测系统提供工具,帮助研究者便捷地自行开发和优化检测试剂盒,实现全新生物标志物的高效率检测。
中文名
爱里斑单分子免疫检测技术
外文名
Single Molecular Counting
SMCTM技术定义:
单分子检测(Single Molecule Counting, SMC)是对溶液样品中的特定种类单个分子进行检测和统计,从而对溶液浓度进行检测的定量方法。
SMCTM技术原理:
单分子检测主流的检测技术以Erenna等单分子检测平台为代表,利用毛细管进行免疫荧光标记分子的上样,并以激光聚焦的方式进行激发检测。当荧光素标记分子通过高能量的激光焦点时,荧光素所发射的光闪烁信号被检测器测得。光闪烁信号的次数和强度与分子浓度呈正相关性,从而能建立标准曲线。通过对一定时间之内光闪烁信号进行统计,可以对溶液浓度进行定量检测[1] 。
SMCTM单分子免疫检测技术的主要特点:
1、突破性的超高检测灵敏度
SMCTM单分子免疫检测技术与酶联免疫吸附剂测定(ELISA)操作一样简便,但灵敏度可达到ELISA的约1000倍,成功实现浓度在fmol级别蛋白靶标的检测。高能量的激光通过爱里斑聚焦于溶液里的单个荧光素标记二抗分子,产生的荧光闪烁进行数字化计量,从而实现“单分子检测”。灵敏度远高于传统ELISA,Multiplex等技术的全新单分子检测方法使种类远多于已知蛋白的未知蛋白靶标检测成为现实,将带来全新的基础和转化医学新发现。
2、宽至4个log的大动态检测范围
以Erenna为例,动态检测范围超过4个log,有利于蛋白靶标表达量存在巨大差异的样本进行同时检测。
3、根据靶标丰度灵活选择实验方案
既可使用磁珠又可使用普通96孔板作为抗体包被介质。在灵敏度和成本方面取得了巧妙平衡。
4、便于自行开发检测试剂盒
开创性的新技术往往会应用于开创性的工作。如果检测的是全新的标志物,商业化的整套试剂盒开发工具,可在极短时间内开发新检测试剂盒。
SMCTM技术发展历程:
1996年,Chen等学者成功进行了藻红蛋白的单分子免疫检测( Chen D, et al. Anal Chem, 1996, 68(4):690—696.);
同年,Craig等学者利用单分子免疫检测技术检测了碱性磷酸酶(Craig B, et al. Anal Chem, 1996, 68(4):697—700.);
1998年,Fister等学者进行了罗丹明6G分子的单分子免疫检测(Fister C, et al. Anal Chem, 1998, 70(3):431—437. );
2004年,美国Singlux公司在St. Louis成立,专注于单分子检测技术的开发。此后总部于2006年迁移至加州;
2007年,Singlux公司发明了第一台应用SMC单分子免疫检测技术的检测仪器——Erenna;
2012年,Singlux公司开放了Erenna平台的试剂盒开发技术;
2014年,德国Merck公司收购Singluex公司,将Erenna推向商业应用,目前配合Erenna的试剂盒已超过50种。