GEF活性检测试剂盒 鸟苷酸交换因子活性检测
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中文名称:GEF 转化活性检测试剂盒
英文名字:GEF Exchange Assay
供应商:Cytoskeleton
产品货号:BK100
产品报价:¥10196.16/KIT60-300assays
小GTP酶的Ras超家族(如Ras、Rho、Rab、Arf和Ran蛋白)充当在GDP结合的“关闭状态”和GTP结合的“打开状态”之间循环的二元开关。在细胞中,两种状态之间的循环主要由两种调节蛋白控制:激活的鸟嘌呤核苷酸交换因子(GEF)和失活的GTPase激活蛋白(GAPs)。GEFs通过催化其目标GTP酶上的核苷酸交换发挥作用。GEF将与核苷酸结合的GTPase结合,从而释放结合的核苷酸,从而产生无核苷酸的GEF GTPase反应中间体。该无核苷酸复合物随后将吸收一个新的核苷酸,之后GEF从GTPase中释放。因为GEF通常对GDP结合GTPase的亲和力高于相应GTP结合GTPase,并且GTP与GDP的细胞内比率约为10:1,GEFs将推动从GDP结合GTP酶到GTP结合GTP酶的交换。本试剂盒中基于荧光团的分析适用于测量96孔或384孔GTP酶上的核苷酸交换。该试剂盒测量荧光核苷酸类似物N-甲基蒽酰-GTP(mant GTP)对GTP酶的摄取。由于游离和GTPase结合的mant-GTP之间的光谱差异,可以测量摄取。当mant GTP结合在GTP酶的核苷酸结合袋中时,其荧光(ex:360 nm,em:440 nm)显著增加(1,2)。因此,在存在小GTP酶的情况下,mant GTP荧光强度的增强表明GTP酶摄取核苷酸(或交换已结合的核苷酸)。该试剂盒包含分析所需的所有缓冲液和试剂、96孔板和384孔板,以及人Cdc42、Rac1和RhoA GTPases和Dbs的GEF结构域作为阳性对照GEF。Dbs是Cdc42和RhoA的有效GEF,但Rac1的GEF活性非常低。该试剂盒为96孔格式的每种GTPase提供20次分析,或为384孔格式的每种GTPase提供100次分析。
保存建议:厂家推荐常温运输,收到产品后建议保存于4°C。
Cytoskeleton专注于生物化学和细胞过程研究中的纯化蛋白和便捷试剂盒开发与生产。公司提供药物筛选、信号转导、蛋白质转录后修饰(PTM)、细胞骨架研究相关的系列试剂盒和产品,尤其以细胞骨架相关研究见长,既能满足于样品较少的科学研究,也可以用于小规模筛选研究和高通量大规模筛选研究。艾美捷科技是Cytoskeleton的中国代理商,为您提供优质的GEF活性检测试剂盒。
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