前面我们提到CpG-DNA应用广泛,在肿瘤治疗、提高机体免疫力和抗寄生虫等方面都有应用。那么CPG ODN又是什么呢?
CPG ODN(CpG oligonucleotide, CpG寡脱氧核苷酸)是人工合成的含有非甲基化的胞嘧啶鸟嘌呤二核苷酸(CpG)的寡脱氧核苷酸 (ODN), 可模拟细菌DNA刺激多种哺乳动物包括人的免疫细胞。
不同类型的CpG ODN的结构特征与免疫效应各有不同,一般分为A、B、C三类,小艾这里就说三种类型的CpG ODN吧。
A类CpG ODN以含有CpG二核苷酸的回文序列为核心,两端为poly G尾,磷酸二酯键骨架为部分硫代修饰,通过回文序列和poly G形成高级结构,能够活化浆细胞样树突状细胞诱生大量I型干扰素,对B细胞活性弱。
B类CpG ODN是一种全硫代修饰的线性CpG ODN,对B细胞有很强的免疫刺激活性,但不能活化浆细胞样树突状细胞。
C类CpG-ODN是一类全硫代修饰的CpG ODN,能通过回文序列形成二聚体,兼具A型和B型CpG-ODN的活性,既能活化浆细胞样树突状细胞,又能活化B细胞。
一篇发表在Nat Immunol杂志上的文章,利用Hycult Biotech的CpG-B DNA (ODN 2006)(HC4039)揭示了内质网中TLR9活化机制。该文章结果显示,CpG-DNA进入细胞后,内质网上的TLR9被重新分布并直接与CpG-DNA结合。下图分别是CpG-DNA与TLR9互作的IP和IF实验结果。
引用文献:
Latz, E et al; TLR9 signals after translocating from the ER to CpG DNA in the lysosome. Nat Immunol 2004, 5: 190.
以上三类CpG-DNA试剂,你可以根据你的实验需求选择不同类型不同种属的CpG-ODN试剂。此外,小艾还推荐多种属的非免疫激活性CpG-ODN以供阴性对照使用。如下:
Non CpG-DNA, Human/Mouse, 200 nmol HC4034
CpG-DNA, Mouse, 200 nmol HC4033
Non CpG-DNA, Rabbit, 200 nmol HC4042
CpG-B DNA, Rat, 200 nmol HC4040
CpG-B DNA, Rabbit, 200nmol HC4038
CpG-B DNA (ODN 2006), Human/ Mouse, 200 nmol HC4039
CpG-C DNA (ODN 2395), Human/ Mouse, 200 nmol HC4041
CpG-A DNA (ODN 2216), Human/Mouse, 200 nmol HC4037
文章来源:https://www.amyjet.com/featured/cpg-dna.shtml