传统的抗体稀释液常用的有:脱脂奶粉、TBST、PBST、BSA、市售的抗体稀释液。在选择抗体稀释液需要注意的问题有哪些呢?
1、脱脂奶粉不能用于磷酸化蛋白,保存时间短,颜色变绿,要更换新的抗体,昂贵的抗体不建议使用。
2、PBST不能用来稀释碱性磷酸酶(AP)标记的抗体,含AP标记的二抗不能使用PBST稀释。
3、抗BSA的抗体不能使用含BSA的抗体稀释液,能与BSA结合的抗体,会发生交叉反应,产生背景。
4、含有叠氮钠的市售抗体稀释液,不能用来稀释辣根过氧化酶 (HRP)标记的抗体,且有毒,用时小心。
5、对于初次使用抗体时,TBST更安心。
传统的抗体稀释液有这么多局限性,那有没有通用型的抗体稀释液,可以适用于磷酸化,AP、HRP等偶联的抗体,并且在降低背景的同时,有增强信号的作用,无需烦恼选用哪种抗体稀释液,也不用再在丁香园、小木虫等网站求助。
事实上,Abbkine增强型抗体稀释液—BMU103-CN SuperKine? 增强型抗体稀释液,可以解决这个问题,它不仅有增强抗体的效果,且无蛋白,纯化学试剂成分,适用AP,磷酸化,HRP等偶联的抗体。
此外,它还有一定的保存效果,且不含磷酸盐、叠氮钠等成份,含有的抗体结合增强成份,可有效增强抗原与抗体的结合反应,减少抗体使用量,以节约抗体。
纯化学成分—— 无动物蛋白,无抗原抗体交叉反应风险。
信号增强——含有抗体抗原结合增强成份,且无磷酸盐。
节时快捷——孵育1h就可以达到很强的效果,无需过夜,实现1天能做完WB的梦想。
兼容性好——兼容辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶和生物素标记的二抗。
安全无毒——加入新型的防腐剂,无叠氮钠,无毒健康,使用安心。
即用溶液——无需稀释,直接使用。
适用广泛——适用于多种免疫检测实验(WB、IHC、ELISA、IF)。
Superkine? 增强型抗体稀释液(BMU103-CN)与普通抗体稀释液(TBST)以及同级竞品(B品牌)进行对比WB实验
蛋白样品:HEK293细胞;
一抗(NFkB 小鼠单克隆抗体, ABM0017,1:5000)溶液室温孵育1 h,TBST洗涤;
二抗(辣根过氧化物酶标记山羊抗鼠IgG, A21020,1:10000)溶液室温孵育1 h,TBST洗涤;
ECL发光液(超敏型ECL发光液(飞克级)货号:BMU102-CN)孵育1-2 min,然后曝光相同时间成像。
注意事项:抗体稀释的浓度依据自己的实验自己摸索的,不同实验中,不同抗体稀释倍数不同。
文章来源:http://www.abbkine.cn/enhanced-antibody-dilution-buffer